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酸棗仁皂苷主要來源于鼠李科植物酸棗的種子和果實,酸棗仁是一味中藥材,皂苷是其中的主要活性物質成分,具有抗氧化等作用,被廣泛的應用在不同領域中。對酸棗仁皂苷的提取,是需要采用溶劑萃取的。通過有機溶劑比如乙醇、乙酸乙酯等,使得皂苷從樣品中分離出來,在進行過濾、濃縮、減壓蒸餾等方式,得到相對純化的酸棗仁皂苷物質。酸棗仁皂苷屬于四環(huán)三萜類皂苷,其中包括酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B、酸棗仁皂苷E等十幾種。
使用分光光度法可以測定樣品中酸棗仁總皂苷的含量,也可以使用高效液相色譜-質譜聯(lián)用(LC-MS)法測定具體單個皂苷的含量。對照品選擇的是人參皂苷Rb1,用甲醇配置成1g/L溶液,備用。選擇6個不同體積的標準品溶液,加入香草醛和硫酸,水浴加熱15min,冷卻后在最佳的檢測波長處,檢測對應的吸光度。以吸光度為橫坐標,以濃度為縱坐標,制作標準曲線,回歸方程及相關系數(shù)。取酸棗仁供試品的溶液,在最佳的波長處檢測吸光度,可以多做幾次重復,求取平均值。測定的吸收峰值,帶入標準曲線的回歸方程,可以獲得樣品的酸棗仁皂苷rb1濃度,根據(jù)酸棗仁rb1占總皂苷的比例,計算出樣品中總皂苷的含量。
高效液相色譜法檢測酸棗仁皂苷A,采用C18的色譜柱,以乙腈和水為流動相,梯度洗脫,使用蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論板數(shù)按酸棗仁皂苷A峰計算,應不低于2000。以酸棗仁皂苷A為標準品,精密稱量,并以甲醇定容,制成0.1g/L的溶液。對于供試品,先粉碎,后過篩,在索氏提取器中,加入石油醚,加熱回流4h,除掉石油醚和殘渣,放在錐形瓶中,加入乙醇溶液,加熱回流2h,過濾。殘渣用乙醇溶解,并轉移到5mL容量瓶中定容。分別吸取標準品溶液5uL,10uL,樣品溶液10uL,注入高效液相色譜中測定,外標兩點法測定計算。具體可以參考中國藥典。
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