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高效液相色譜法檢測神經(jīng)遞質含量
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2024-05-16 | 168 次瀏覽 | 分享到:

神經(jīng)遞質是指神經(jīng)元和細胞之間傳遞信息的化學物質,常見的有膽堿類、單胺類、氨基酸和神經(jīng)肽類等。常用的檢測方法是高效液相色譜(HPLC)法、液質聯(lián)用(LC-MS)法。



LC-MS檢測神經(jīng)遞質的含量,是基于神經(jīng)遞質在生物樣品中的化學性質和分子量進行檢測的??梢詼y定具體神經(jīng)遞質的分子量、結構信息和含量。HPLC檢測神經(jīng)遞質含量,主要包括樣品準備、衍生化、色譜分離、檢測器選擇、標準曲線制作,樣品檢測和計算結果。


樣品準備:收集需要做檢測的生物樣本,通過組織勻漿、蛋白沉淀、固相萃取等步驟純化樣品。


衍生化:有的神經(jīng)遞質是不穩(wěn)定的,需要通過衍生化處理,以增加神經(jīng)遞質在色譜系統(tǒng)中的穩(wěn)定性,提高靈敏度。


色譜分離:選擇適合的色譜柱和檢測器,比如C18的色譜柱,有機溶劑和水的流動相,紫外檢測器,質譜檢測器等,將處理后的樣品溶液注入到HPLC系統(tǒng),利用色譜柱和流動相的條件將神經(jīng)遞質分離出來。


標準曲線:使用液相檢測,就要用到標準品作為參照,識別出樣品中的神經(jīng)遞質。并通過梯度體積的上樣檢測,得到對應的峰圖譜,根據(jù)峰高和峰面積,對應制作出來標準曲線,以確保檢測結果的準確性和可重復性。


數(shù)據(jù)計算:檢測樣品,就是通過色譜圖分析神經(jīng)遞質的保留時間和峰面積,結合標準曲線計算出樣品中某種神經(jīng)遞質的含量。


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