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維生素C(抗壞血酸)和維生素B族包括維生素B1、B2、B6、B12等都是水溶性維生素。在植物方面,維生素b2能促進(jìn)植物葉片生長(zhǎng),讓葉片更濃綠,抵抗多種植物疾病。維生素C能讓喜酸花草的根系發(fā)育更好,具有抗氧化能力,促進(jìn)鐵的吸收,調(diào)節(jié)土壤pH值,讓果實(shí)更有營(yíng)養(yǎng),還能延長(zhǎng)花期。水溶性維生素主要來(lái)源于新鮮的水果,蔬菜,谷物,動(dòng)物肝臟,瘦肉等,它們?cè)谌梭w內(nèi)存儲(chǔ)比較少,從腸道吸收后,多余的水溶性維生素會(huì)隨著尿排出去。
實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)水溶性維生素的方法,一般情況下使用高效液相色譜(HPLC)或液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出樣品中的維生素含量。
以HPLC測(cè)水溶性維生素為例
1.樣品處理:如果是固體的樣品,粉碎過(guò)篩,稱取1.5g的樣品,加入10-20ml的1%草酸溶液,高速離心15min,去上清液,0.45um膜過(guò)濾,待測(cè)。
2.色譜條件:C18的色譜柱,250mm長(zhǎng),4.6mm內(nèi)徑,粒徑5um,柱溫30℃。0.1%磷酸水溶液-甲醇(95:5)等度洗脫,流速1ml/min。紫外檢測(cè)器,波長(zhǎng)245nm,進(jìn)樣量10-20uL。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線:獲取維生素C的標(biāo)準(zhǔn)品,稱取一定量,用流動(dòng)相來(lái)溶解定容,梯度稀釋成5-7個(gè)點(diǎn),如10ug/mL,50ug/mL,100ug/mL,200ug/mL,500ug/ml等。依次進(jìn)樣到色譜儀中,測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰。對(duì)各個(gè)峰面積進(jìn)行積分,對(duì)應(yīng)各個(gè)濃度值,繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程。
4.樣品測(cè)定:將處理好的樣品溶液,注入到液相色譜儀中,測(cè)出來(lái)的對(duì)應(yīng)的保留時(shí)間的樣品色譜峰。對(duì)峰面積進(jìn)行積分,結(jié)合回歸方程,可以計(jì)算出樣品出的維生素C含量。
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