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藍靛果中花色苷的測定方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2025-03-13 | 44 次瀏覽 | 分享到:
什么是花色苷,它是花色素和糖以糖苷鍵的形式結(jié)合而成的一類化合物。它廣泛的存在植物的花,果實,莖,葉和根等部位,我們能看到它們呈現(xiàn)五顏六色,就是花色苷在細(xì)胞液內(nèi)在不同pH值的條件下的反應(yīng)。在酸性條件下,變成紅色的形式;當(dāng)pH值升高,逐漸的變紫色;當(dāng)接近中性或堿性的時候,變成藍色。花色苷具有獨特的作用,它能清除體內(nèi)的自由基,具有抗炎,保護視力等作用。

什么是花色苷,它是花色素和糖以糖苷鍵的形式結(jié)合而成的一類化合物。它廣泛的存在植物的花,果實,莖,葉和根等部位,我們能看到它們呈現(xiàn)五顏六色,就是花色苷在細(xì)胞液內(nèi)在不同pH值的條件下的反應(yīng)。在酸性條件下,變成紅色的形式;當(dāng)pH值升高,逐漸的變紫色;當(dāng)接近中性或堿性的時候,變成藍色?;ㄉ站哂歇毺氐淖饔?,它能清除體內(nèi)的自由基,具有抗炎,保護視力等作用。


從結(jié)構(gòu)上來看,花色苷有C6-C3-C6骨架,2-苯基色原烯是花色素的母核。分子式:C16H16O6,溶于水。如果花色苷中沒有糖基,就變成花青素了?;ㄉ盏姆€(wěn)定性不高,受影響因素有pH值,氧濃度,酶,金屬離子,溫度和光照等。


花色苷是一類,主要包括矢車菊花色苷,翠雀花色苷,錦葵花色苷,天竺葵花色苷,芍藥花色苷等。


檢測花色苷的某個成分,實驗室一般采用高效液相色譜(HPLC)法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)法、分光光度法等。


以HPLC為例,簡單的介紹一下檢測步驟。


樣品提?。悍Q取一定量的樣本,加入適量的提取溶劑,經(jīng)過低溫超聲,離心提取上清液,經(jīng)過微孔濾膜過濾后,待測。



色譜條件:C18色譜柱,甲醇和水為流動相,流速1ml/min,紫外檢測器(UV)或二極管陣列檢測器(DAD),可以對樣品中的花色苷進行精確的定量分析。LC-MS是液相搭配了質(zhì)譜檢測器(MS), 不僅可以定量檢測花色苷,還能通過質(zhì)譜圖譜提供花色苷的分子質(zhì)量和結(jié)構(gòu)信息。



標(biāo)準(zhǔn)曲線:這是一種外標(biāo)法,采用5-7個標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度點。通過有效的色譜條件,測出各個濃度點的色譜峰或質(zhì)譜峰。對峰面積進行積分,在表格中對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,可以用函數(shù)公式的形式,繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程,相關(guān)系數(shù)r2>0.999。這是前提條件,為樣品的測定和結(jié)果計算做準(zhǔn)備的。



樣品測定:其實,檢測樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的條件是一樣的。這樣,才能在保持相對一致的條件下,有測量的可行性。當(dāng)然,如果有用內(nèi)標(biāo)法的也是可以的。有的時候,用的同一根色譜柱。如果怕反復(fù)測標(biāo)準(zhǔn)品,會對樣品有所污染,也可以先測樣品。通過測出來的樣品的色譜峰,積分后,用回歸方程計算出對應(yīng)花色苷的含量。


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