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粗蛋白是各種含氮物質(zhì)的總稱,包括蛋白質(zhì)和非蛋白含氮物等。它對(duì)生長(zhǎng),發(fā)育,繁殖等都有重要的作用,是生命活動(dòng)必需的基礎(chǔ)養(yǎng)分。它主要存在于奶類,肉類,蛋類,豆類,以及飼料等。檢測(cè)飼料中粗蛋白的含量,可以評(píng)估它的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,進(jìn)一步提高生產(chǎn)效率和經(jīng)濟(jì)效益。在食品行業(yè),對(duì)粗蛋白的檢測(cè)要求呈持續(xù)增長(zhǎng)的趨勢(shì)。粗蛋白的檢測(cè)方法主要有化學(xué)法和儀器法。其中,化學(xué)法包括凱氏定氮法,雙縮脲法等;儀器法包括紅外光譜法,紫外可見(jiàn)分光光度法等。
檢測(cè)樣品中的粗蛋白含量,凱氏定氮法是通過(guò)測(cè)化合物中的總含氮量的一種方法,最后計(jì)算出物質(zhì)中的總蛋白含量。
1.樣品處理,需要將樣品干燥到恒重,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的含氮量有一定比例的。測(cè)的是含氮量,干燥到恒重的狀態(tài),相對(duì)準(zhǔn)確的計(jì)算出粗蛋白的含量。一般是加入催化劑,比如硫酸銅和硫酸鉀,濃硫酸,進(jìn)行消化處理。
2.消化處理,是在消煮爐中加熱的,目的是讓樣品中的蛋白質(zhì)能夠分解成氨基酸,進(jìn)一步變成氨和二氧化碳?xì)怏w。
3.蒸餾,將樣品分解出來(lái)的氨,蒸餾出來(lái),便于進(jìn)一步的滴定。一般用將消化液,加入氫氧化鈉進(jìn)行蒸餾,讓樣品中的氨跑出來(lái),并溶解到硼酸中。
4.滴定,現(xiàn)在樣品中的氨,已經(jīng)被硼酸吸收了。需要做的就是知道硼酸中的氨有多少含量。用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液滴定硼酸中的氨,記錄消耗的鹽酸體積。計(jì)算出氮的含量,并根據(jù)樣品的重量,換算系數(shù),可以計(jì)算出樣品中粗蛋白的含量。
除了凱氏定氮法,還有杜馬斯燃燒法,利用標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法,定量計(jì)算出樣品中的粗蛋白含量。
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