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甲酸是從自然界中的一些物質(zhì)中提取出來的,比如木材,水果,蜂蜜,蠶絲等。其實,很早的時候是從螞蟻的體內(nèi)提取出來的,也稱為“蟻酸”。后來,發(fā)現(xiàn)越來越多的地方都有甲酸,比如人的皮膚,肌肉,血液和排泄物。甲酸能夠通過天然物質(zhì)提取,也可以靠人工合成。
化學(xué)式為HCOOH,是最簡單的一種脂肪酸。它無色透明,卻散發(fā)出一種強烈的,富有刺激性的氣味,具有一定的腐蝕性。甲酸看起來是酸,但卻有還原性,可被氧化成二氧化碳和水。當(dāng)然,和其他的有機物能發(fā)生多種反應(yīng)。它同時具有醛基和羧基的性質(zhì),可以發(fā)生銀鏡反應(yīng),加成反應(yīng),酯化反應(yīng),還原反應(yīng),燃燒反應(yīng)等。甲酸是一種弱的電解質(zhì),可以作為有機化工原料,比如表面處理劑,橡膠助劑,工業(yè)溶劑等,應(yīng)用在農(nóng)藥,皮革,染料,醫(yī)藥和橡膠等行業(yè)。
檢測方法,包括氣相色譜(GC)法,高效液相色譜(HPLC)法等。
1.氣相色譜法(GC)
是將甲酸和乙醇進行酯化反應(yīng),生成具有揮發(fā)性的甲酸乙酯。這樣,就可以進樣到氣相色譜儀,測定出它的色譜峰,根據(jù)內(nèi)標(biāo)或外標(biāo)法,計算出樣品中的甲酸含量。
在氣相色譜儀中,樣品被注入色譜柱,并蒸發(fā)成氣態(tài),通過色譜柱分離,在檢測器中測定出色譜峰,通過標(biāo)曲,定量分析。一般用氫火焰離子檢測器(FID),選擇適合的色譜柱。參考色譜條件,進樣口溫度140℃,檢測器溫度250℃,設(shè)置合適的升溫程序,以氮氣作為載氣。
外標(biāo)法就是標(biāo)準(zhǔn)曲線,也就是用甲酸標(biāo)準(zhǔn)品,成倍的稀釋成5-7個梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液。以上述的色譜條件,測出色譜峰,根據(jù)峰面積和對應(yīng)濃度的關(guān)系,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程。對樣品的色譜峰面積進行積分,并代入回歸方程,計算出樣品中的甲酸含量。
2.高效液相色譜法(HPLC)
精確混勻液體樣品,取出4000r/min離心10分鐘,混勻,過濾膜,待上機檢測。
色譜條件:
C18的色譜柱,250*4.6mm*5μm,柱溫30℃;紫外檢測器,波長210nm;以0.1%磷酸水:甲醇=97.5:2.5為流動相,等度洗脫,流速1ml/min,進樣量10-20ul。
同樣,采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法來計算樣品中的甲酸含量。
標(biāo)準(zhǔn)點5-7個梯度,在檢測器的有效的范圍內(nèi)。根據(jù)測出來的色譜峰面積,對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品濃度,繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程,相關(guān)系數(shù)r2>0.999。對樣品進行同樣的條件,上機測試。對測出來的色譜峰面積進行積分,結(jié)合回歸方程,是可以計算出甲酸含量的。很多時候,還要有方法學(xué)的要求,比如重復(fù)性,回收率等。
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