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精氨酸含量檢測方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-06-12 | 207 次瀏覽 | 分享到:

精氨酸是一種堿性的氨基酸類化合物,參與人體內(nèi)的鳥氨酸循環(huán),促進(jìn)尿素的形成。它的作用也很簡單,就是將人體內(nèi)產(chǎn)生的氨經(jīng)過鳥氨酸循環(huán),轉(zhuǎn)變成無毒的尿素,最后進(jìn)入尿中排放出來。在自然界中,它存在L和D兩種異構(gòu)體,具有旋光性。左旋精氨酸,是細(xì)胞質(zhì)和核酸蛋白的主要成分,參與機(jī)體蛋白質(zhì)、谷氨酰胺和多胺的形成。在醫(yī)藥工業(yè)方面,它具有獨(dú)特的生理和藥理作用,可以作為一些生物試劑的輔料。



在科研檢測方面,常規(guī)的方法有高效液相色譜(HPLC)法、氨基酸分析法、生化法等。根據(jù)對數(shù)據(jù)的要求以及樣品實(shí)際情況,采用對應(yīng)的檢測方法,做到既高效準(zhǔn)確,又經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。這里著重說一下高效液相色譜法,它包括樣品處理,儀器設(shè)備調(diào)試,方法建立和運(yùn)行,數(shù)據(jù)分析和結(jié)果處理等方面。做實(shí)驗(yàn)的,要能夠熟練操作設(shè)備,才能讓設(shè)備發(fā)揮更好的性能,從而獲得更清晰的、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。同時(shí),需要了解方法,包括樣品處理和液相檢測。結(jié)果怎么樣,還是要對數(shù)據(jù)的處理方法。遵循一定的原則,但又要準(zhǔn)確。



整個(gè)過程中,樣品處理和檢測方法是比較關(guān)鍵的。樣品處理過程中,條件和環(huán)境要求,每個(gè)參數(shù)需要恰當(dāng)和正確的。檢測方法主要取決于參數(shù),比如色譜柱的類型、流動(dòng)相比例、柱溫、進(jìn)樣量、進(jìn)樣速度等。還要會(huì)看色譜峰,數(shù)據(jù)處理,都需要有相關(guān)的技術(shù)人員進(jìn)行操作。中間有一點(diǎn)出現(xiàn)偏差,就會(huì)影響到最終的結(jié)果。測定標(biāo)準(zhǔn)品,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,樣品溶液進(jìn)樣檢測,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品精氨酸含量。



在色譜條件下,分別精密吸取對照品溶液7個(gè)梯度進(jìn)樣量注入到色譜儀,測定峰面積,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并計(jì)算回歸方程。精密吸取供試品溶液,同一色譜條件下,連續(xù)進(jìn)樣6次,測定精氨酸含量平均值和RSD值,分別測定供試品的重復(fù)性穩(wěn)定性和回收率。


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