甜菜堿是一種生物堿，它的結(jié)構(gòu)和氨基酸類(lèi)似，屬于季銨堿類(lèi)物質(zhì)。它廣泛存在于動(dòng)植物體內(nèi)，比如植物的枸杞、甜菜、豆科植物等都含有甜菜堿，動(dòng)物的章魚(yú)、蝦等也含有甜菜堿。甜菜堿一般是從天然植物的根莖葉和果實(shí)中提取出來(lái)的，屬于重要的次生代謝產(chǎn)物，它能夠增強(qiáng)植物的抗逆性，比如抗鹽堿，耐旱等。另外，它也被廣泛的應(yīng)用在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、食品科學(xué)等領(lǐng)域。為了檢測(cè)植物中甜菜堿的含量，通常情況下要看具體的需求。那么，常見(jiàn)的方法有滴定法、分光光度法、高效液相色譜（HPLC）法等。

1.滴定法

為了準(zhǔn)確的測(cè)定甜菜堿的含量，就要對(duì)樣品進(jìn)行干燥處理，在105℃的烘干到恒重，稱(chēng)取干燥的樣品0.4g，加入冰醋酸50mL，加熱到溶解的。加入25mL的乙酸汞溶液，冷卻至室溫。加入結(jié)晶紫指示劑2滴就夠了，這個(gè)時(shí)候就可以用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定了。高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液一般用0.1mol/L，這個(gè)濃度不能太高，防止滴定終點(diǎn)不準(zhǔn)確。在滴定的過(guò)程中，如果發(fā)現(xiàn)溶液突然變成綠色了，那就是到滴定終點(diǎn)，剛剛好反應(yīng)完全了。根據(jù)消耗的情況，計(jì)算出樣品中含有甜菜堿的含量，需要將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)來(lái)校正。

2.分光光度法

檢測(cè)甜菜堿含量，用分光光度法相對(duì)比較簡(jiǎn)單。首先，將樣品溶解到溶劑中，也就是進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?。接著，選擇適當(dāng)?shù)臋z測(cè)波長(zhǎng)，利用分光光度計(jì)測(cè)定樣品的吸光度值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算出樣品中甜菜堿的含量。此外，還可以利用比色的方法完成檢測(cè)。也就是在pH=1.0的條件下，甜菜堿鹽酸鹽能夠和雷氏鹽生成紅色沉淀，通過(guò)離心，去除上清液留下沉淀。讓沉淀溶解在70%的丙酮中并呈粉紅色溶液，在525nm處利用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算出樣品的甜菜堿含量。

3.高效液相色譜（HPLC）法

含有甜菜堿的植物樣品經(jīng)過(guò)甲醇溶液的提取，用混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱凈化，再用乙腈定容，最用在205nm波長(zhǎng)的紫外檢測(cè)器讀取數(shù)據(jù)，記錄色譜峰的保留時(shí)間，峰高和峰面積，使用外標(biāo)法定量測(cè)定結(jié)果。

檢測(cè)條件

色譜柱親水作用多孔硅膠色譜柱150 mmXh.6mm,5 um。流動(dòng)相：乙腈——水，梯度洗脫。流速1.0 mL/ min。柱溫30℃，波長(zhǎng)205 nm，進(jìn)樣量10.0uL。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作

用乙腈溶液將甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)貯備液溶液逐級(jí)稀釋7個(gè)點(diǎn)，作為標(biāo)準(zhǔn)工作液依次由低到高進(jìn)樣。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

樣品檢測(cè)

取標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣品定容液進(jìn)樣測(cè)定，以色譜峰保留時(shí)間定性，以標(biāo)樣色譜峰峰面積和樣品溶液峰峰面積比較定量。同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)。