木聚糖是一種存在于植物細(xì)胞壁中的多糖類(lèi)物質(zhì)，是植物半纖維素的主要成分。木聚糖的結(jié)構(gòu)是復(fù)雜的，而且具有高度分枝。如果要降解木聚糖，就需要一組相對(duì)復(fù)雜的酶，通過(guò)相互配合的方式，共同來(lái)降解掉木聚糖。它主要包括β-1,4-內(nèi)切木聚糖酶、外切β -1,4- 木聚糖酶、β-木糖苷酶、α-L-阿拉伯糖苷酶、α-D-葡糖苷酸酶、乙?；揪厶敲负头铀狨ッ?，可降解自然界中大量存在的木聚糖類(lèi)半纖維素。還有很多種類(lèi)的酶，還沒(méi)有被發(fā)現(xiàn)，需要進(jìn)一步的探索。木聚糖酶分布廣泛，可以從動(dòng)物、植物及微生物體內(nèi)獲得。現(xiàn)在，木聚糖酶已應(yīng)用在釀造、飼料工業(yè)生產(chǎn)中。常用的檢測(cè)方法有分光光度法，高效液相色譜法等。

檢測(cè)原理：木聚糖酶可以將底物木聚糖降解為寡糖和單糖，具有還原性的寡糖和單糖在沸水浴的條件下，能夠和DNS試劑發(fā)生顯色反應(yīng)。通過(guò)反應(yīng)溶液的顏色的變化，來(lái)確定還原糖的含量。因?yàn)檫€原糖的生成量和反應(yīng)液的木聚糖活力是成正比的，通過(guò)分光光度法可以測(cè)定，計(jì)算出樣品中的木聚糖酶活力。

檢測(cè)所用的試劑有：乙酸溶液、乙酸鈉溶液、氫氧化鈉溶液、乙酸-乙酸鈉緩沖溶液、木糖溶液、木聚糖溶液、DNS試劑。所需要的儀器設(shè)備有：碾缽、分樣篩、分析天平、pH計(jì)、磁力攪拌器、電磁振蕩器、離心機(jī)、恒溫水浴鍋、分光光度計(jì)等。

標(biāo)準(zhǔn)曲線：吸取乙酸-乙酸鈉緩沖溶液4ml，加入DNS試劑5ml，沸水浴加熱5min，用自來(lái)水冷卻至室溫，用水定容至25ml，制成標(biāo)準(zhǔn)空白樣。分別吸取木糖溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml，加入緩沖溶液定容至100ml，配制成0.1-0.7mg/ml的木糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。按照上述的標(biāo)準(zhǔn)溶液配制，分別做2次平行。吸取木糖標(biāo)準(zhǔn)溶液2ml，分別加入2ml水和5mlDNS試劑。電磁振蕩3s，沸水加熱5min，用自來(lái)水冷卻至室溫，用水定容至25ml。以標(biāo)準(zhǔn)空白樣作為對(duì)照，在540nm處測(cè)吸光度OD值。以木糖濃度為Y軸，吸光度OD值為X軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

檢測(cè)過(guò)程：吸取10ml木聚糖溶液，37℃平衡10min。吸取10ml經(jīng)過(guò)稀釋的木聚糖酶溶液，37℃平衡10min。吸取2ml平衡過(guò)的木聚糖酶液，加入5mlDNS試劑，電磁振蕩3s。加入2ml木聚糖溶液，37℃保溫30min。沸水浴加熱5min，用自來(lái)水冷卻至室溫，加水定容至25ml，電磁振蕩3s。以標(biāo)準(zhǔn)空白樣為空白對(duì)照，在540nm處測(cè)定吸光度。以同樣的方法，加入2ml的木聚糖酶，電磁振蕩3s，37℃精確保溫30min，加入5mlDNS試劑，電磁震蕩3s，以終止酶解反應(yīng)。沸水浴加熱5min，用自來(lái)水冷卻至室溫，加水定容至25ml，振蕩3s，以標(biāo)準(zhǔn)空白樣為空白對(duì)照，在540nm處測(cè)定吸光度。

計(jì)算結(jié)果：根據(jù)反應(yīng)前后的吸光度值差以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)，計(jì)算出樣品中的木聚糖酶活。