香豆酸是一種內(nèi)酯類化合物，主要分布在禾科植物的莖稈中和豆科植物中，比如蘋果，葡萄，柚子，茄子，胡蘿卜，青椒，小麥，大麥，玉米，花生，核桃，杏仁，大豆等。它的化學(xué)式為C6H4O4，分子量為140.9，微溶于冷水，苯和氯仿，易溶于熱水，甲醇，乙醇等，不溶于二氯甲烷和石油醚。在科研過程中，香豆酸具有廣泛的藥理作用，如抗氧化，抗炎，免疫調(diào)節(jié)，保護(hù)神經(jīng)等作用，被廣泛的用在醫(yī)藥，食品，日用品和飼料等領(lǐng)域。

檢測方法：高效液相色譜（HPLC）。

1.樣品處理

將含有香豆酸的樣本進(jìn)行粉碎，過篩，并加入適量的甲醇進(jìn)行溶解。超聲波處理，讓樣本中的香豆酸充分溶解到甲醇中，并通過0.22um的微孔膜過濾。

2.色譜條件

C18色譜柱，250mm長，4.6mm內(nèi)徑，5um粒徑；柱溫30℃。以0.1%甲酸水為流動相A，甲醇為流動相B，梯度洗脫，流速1ml/min。紫外檢測器，波長320nm，進(jìn)樣量10uL。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

將香豆酸的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行溶解，可以用有機(jī)溶劑如甲醇，制成1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。進(jìn)行梯度稀釋6個濃度，并記錄各個濃度值。依次上機(jī)測定色譜峰，對色譜峰面積進(jìn)行積分。以濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，在表格中的函數(shù)公式繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，相關(guān)吸收r2一般要大于0.999。

4.樣品測定和計算

將制備好的樣本溶液也進(jìn)樣到HPLC中，根據(jù)色譜峰的保留時間位置，可以獲得目標(biāo)色譜峰。對色譜峰面積進(jìn)行手工或自動的積分，代入回歸方程，可以計算出樣品中的香豆酸含量。