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柚子采摘于秋冬之際,是水果中的佳品。皮香肉厚,色澤鮮美,汁水飽滿,酸甜可口,風味濃郁,芳香四溢,回味無窮啊。《本草綱目》記載:柚皮能消食快膈,散憤懣之氣,化痰。根據現代藥理學研究證明,柚子中含有多種維生素,胡蘿卜素,揮發(fā)油,糖類,蛋白質等。其中,柚皮甙是一種有效的化學成分,具有科學研究作用。
柚皮甙是一種黃酮類化合物,來源于蕓香科植物柚,特別是葡萄柚,橘子和橙子的果皮或果肉中。化學式為C27H32O14,分子量為580.53,溶于甲醇、乙醇、丙酮、醋酸、稀堿溶液和熱水,不溶于石油醚,乙醚,苯和氯仿等非極性溶劑。柚皮甙具有多種藥理活性,比如調節(jié)血脂血糖,保護神經,抗炎抗菌,抗氧化等特點。
檢測樣品中的柚皮甙的含量,實驗室一般采用的是高效液相色譜(HPLC)法。
1.樣品處理
將柚子皮經過粉碎、干燥等步驟后,提取其中的柚皮甙。根據柚皮甙的物理或化學性質,常用有機溶劑提取、超聲波提取等。提取后,還需對提取液進行凈化處理,以去除其中的雜質和干擾物質。
2.色譜條件
采用常規(guī)的C18色譜柱,250mm長,內徑4.6um,粒徑5um,柱溫為室溫;采用乙腈和水(25:75)或甲醇和水(30:70)為流動相,等度洗脫,流速1ml/min(僅供參考),紫外檢測器,波長270nm或284nm,進樣量10uL。根據相關的文獻參考方法,或標準操作進行驗證,看結果進行調整參數。
3.標準曲線
標準曲線是一種外標法,是獨立于樣品的測試。它是將柚皮甙標準品使用有機溶劑進行溶解并成倍梯度稀釋,制作出6個不同的濃度點,確保在紫外檢測器的有效范圍內。6個點的濃度標準品,依次進樣到HPLC,依據有效的色譜條件,測出色譜峰來。這樣就知道柚皮甙的色譜峰保留時間,記錄下來,在樣品測定的時候,就能找到這個峰的位置,便于對峰進行識別,積分和含量計算。根據測出來的各個標準溶液的峰面積,對應濃度,繪制出標準曲線,得到回歸方程。
4.含量計算
樣品的測定方法和標準品相同的,有的時候為了避免色譜柱被標準品污染,也可以先測樣品。將測出來樣品的色譜峰面積進行手工或自動積分,代入到回歸方程,是可以計算出樣品中的柚皮甙含量。
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