維生素b2，又稱為核黃素，是B族維生素的一種。化學式為C17H20N4O6，分子量376.37，微溶于水，可溶于氯化鈉溶液，稀的氫氧化鈉溶液，在強酸溶液中穩(wěn)定。光照和紫外照射，可對它產(chǎn)生不可逆的分解。廣泛存在于酵母、肝、腎、蛋、奶、大豆等中，它不會蓄積在體內(nèi)，需要經(jīng)常的從食物中獲取。

在生物體內(nèi)，維生素b2主要參與多種生化反應。比如，生物氧化和能量代謝，參與維生素b6和煙酸的代謝，并具備抗氧化活性。食物中的維生素b2是以黃素單核苷酸（FMN）和黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）輔酶形式和蛋白質(zhì)結(jié)合存在，當它進入人的胃中的時候，在胃酸的作用下和蛋白質(zhì)分離，轉(zhuǎn)變成游離的維生素b2，在小腸部位被吸收。它的主要功能是促進代謝，促進細胞的再生，讓皮膚，指甲，毛發(fā)能夠正常生長，預防口腔和皮膚的炎性疾病，增進視力，降低眼睛疲勞等。

實驗室的檢測方法，一般包括高效液相色譜（HPLC）和比色法。都可以用，根據(jù)實際情況來選擇檢測。這里以HPLC為例，簡單的介紹一下檢測流程和注意問題。

1.樣品處理

在處理樣品之前，要了解樣品的物理和化學性質(zhì)，根據(jù)維生素b2的特點來確定方法。根據(jù)文獻方法或成熟的處理步驟進行，比如稱取5g樣品，在250ml的錐形瓶中，加入鹽酸溶液10mL，搖勻。這個鹽酸溶液是需要提前準備好的，通過121℃高溫加熱30min，冷卻至室溫。用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到4.5，使得蛋白質(zhì)沉淀，轉(zhuǎn)移到適量的棕色容量瓶中，定容，搖勻，過濾。濾液再經(jīng)過0.45um濾膜過濾，待測或避光保存。

2.色譜條件

確定色譜檢測方法，其實是對維生素b2的基礎的物理和化學性質(zhì)的考查。舉個例子，采用C18的色譜柱，150mm×4.6mm，5μm；柱溫30℃，以甲醇和0.05mol/L的乙酸鈉溶液（35:65）為流動相，流速1.0ml/min。進樣量10-20uL，紫外檢測器，波長440nm，根據(jù)實際情況進行驗證和調(diào)整。

3.標準曲線

使用標準品溶解，進行適當?shù)?、梯度稀?個濃度點。最低點要在檢測器的有效檢測范圍，一般選擇是機器信噪比的5-10倍。根據(jù)比較適合的色譜條件，依次上機測定它們的色譜峰。對色譜峰面積進行手工或自動積分，對應各個點的濃度值，在表格中使用函數(shù)公式，繪制出標準曲線，得的回歸方程，相關系數(shù)r2一般情況下要大于0.999。有的時候，為了需求，需要對方法的重復性，精密度，回收率等進行確認。

4.樣品測定

怎么確定樣品出來的峰就是目標化合物的峰呢，通過對標準品的檢測，程序是相同的，那么保留時間也應該是一樣的。通過對樣品的色譜峰面積進行積分，結(jié)合回歸方程，是可以計算出樣品中的維生素b2的含量的。